蛋白质纯化浓缩新概念
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| 蛋白质的分离纯化过程中,离子交换柱层析法为经常使用的手段之一。但是由于离子交换柱层析法本身具有一些缺陷,其在实际应用过程中,具有操作复杂、耗时、对小型样品处理流速只能限制在1-10ml/min范围内,流速过高会造成树脂容易损坏等不足,并且离子交换柱层析法只能用于蛋白质分离过程,而不能对蛋白质进行浓缩。 |
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| 为了解决这一难题,德国赛多利斯公司专门发明了微孔离子交换膜(SartobindTM)这一全新技术概念的产品。该产品具有非常高的实用价值,既可以与制备性液相色谱仪联用,也可以与快速蠕动泵连接,对于少量样品的处理也可以采用注射器,一次试验即可将蛋白质的纯化和高倍浓缩工作同时完成,微孔离子交换膜具有耐压力强、化学稳定性高,吸附蛋白量大(2mg/cm2)、流速快(最高可达3L/min)、运行时间短、操作简单方便等特点。利用该法进行蛋白质的处理和制备无论是克级或是公斤级所有操作都非常简单。 |
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表1. 微孔离子交换膜(Sartobind™)技术参数
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材质
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超稳定交织醋酸纤维素,孔径<3µm
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化学官能团
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离子交换(见表2)
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蛋白质吸附容量
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1-2 mg/cm2
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蛋白质回收率
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>95%
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流速/cm2xba
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80-100 mL
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清洗及再生
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1N碱(e.g. NaOH);1N酸(e.g. HCl)
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热稳定性
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可在121°C高温消毒
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最大压力
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7 bar(125 psi)
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pH适用范围
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pH 2-13
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表2. 微孔离子交换膜(Sartobind™)化学官能团
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Sulfonic acid, 磺酸(S)
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强阳离子交换
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R-CH2-(SO3)2-
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Quaternary ammonium,叔胺(Q)
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强阴离子交换
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R-CH2-N+-(CH3)3
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Carboxyl, 羧基(C)
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弱阳离子交换
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R-COO-
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Diethylamine, 二乙基胺(D)
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弱阴离子交换
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R-CH2-N+-(CH2H5)2
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MA5
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MA15
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MA100
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Discs & Modules
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| 即开即用型 |
即开即用型 |
即开即用型 |
单层/膜包型 |
表3. 微孔离子交换膜(Sartobind™)技术规格
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规格
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形式
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有效直径
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膜层数
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吸附面积(cm)2
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流速/1bar
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MA5
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即开即用型
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25mm
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1
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5
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150ml/min
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MA15
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即开即用型
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25mm
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3
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15
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50ml/min
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MA100
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即开即用型
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50mm
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5
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100
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100ml/min
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MA120
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单层
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142mm
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1
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120
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6L/min
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MA550
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单层
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293mm
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1
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550
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30L/min
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MA600X5
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膜包型
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142mm
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5
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600
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0.5L/min
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MA5500X10
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膜包型
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293mm
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10
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5,500
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3L/min
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